Logo BSU

Please use this identifier to cite or link to this item: https://elib.bsu.by/handle/123456789/234655
Title: Целестиновый синий В – зонд для регистрации продукции хлорноватистой кислоты и HOCl-модифицированных белков
Authors: Луценко, В. Е.
Григорьева, Д. В.
Горудко, И. В.
Черенкевич, С. Н.
Горбунов Н. П.
Костевич, В. А.
Панасенко, О. М.
Соколов, А. В.
Keywords: ЭБ БГУ::ЕСТЕСТВЕННЫЕ И ТОЧНЫЕ НАУКИ::Физика
Issue Date: 30-May-2019
Citation: Медицинский академический журнал. – 2019. – Т. 19, вып. 2. – С. 63-72.
Abstract: Цель исследования – изучить продукцию хлорноватистой кислоты (HOCl) и ее производных, обусловленную активностью миелопероксидазы нейтрофилов крови человека, флуоресцентным методом с использованием целестинового синего B. Материалы и методы. Нейтрофилы выделяли из венозной крови здоровых доноров. В качестве агонистов использовали форбол 12-миристат 13-ацетат, N-формил-метионил-лейцил-фенилаланин, лектины растительного происхождения, белки, модифицированные гипогалоидными кислотами. В качестве ингибиторов активности миелопероксидазы нейтрофилов и/или перехватчиков HOCl использовали N-ацетилцистеин, гидразид 4-аминобензойной кислоты, изониазид и церулоплазмин. Результаты. В ходе исследований с применением широкого спектра агонистов и ингибиторов активности миелопероксидазы нейтрофилов и/или перехватчиков HOCl было доказано, что целестиновый синий B окисляется в суспензии стимулированных нейтрофилов в результате продукции ими HOCl и ее производных, обусловленной активностью миелопероксидазы. Окисление целестинового синего B наблюдалось и HOCl-модифицированным сывороточным альбумином человека (HSA-Cl). Моноклональные антитела класса IgM против HSA-Cl ингибировали окисление целестинового синего B в растворе модифицированного белка. Заключение. Разработанный метод позволяет с высокой чувствительностью анализировать HOCl-модифицированные белки (хлорамины и др.), исследовать влияние различных агонистов и лекарственных препаратов на респираторный взрыв нейтрофилов, экзоцитоз и активность миелопероксидазы. Ключевые слова: целестиновый синий B; хлорноватистая кислота; миелопероксидаза; нейтрофилы; флуоресценция.
Abstract (in another language): Objective – the study of hypochlorous acid (HOCl) and its derivatives production, which catalyzed by human neutrophil myeloperoxidase, using “turn-on” fluorescent sensor — celestine blue B. Materials and methods. Neutrophils were isolated from the venous blood of healthy donors. Phorbol 12-myristate 13-acetate, N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine, plant lectins, HOCl-modified proteins were used as agonists. N-acetylcysteine, 4-aminobenzoic acid hydrazide, isoniazid and ceruloplasmin were used as regulators of neutrophil myeloperoxidase activity and/or HOCl scavengers. Results. Using a wide range of agonists and inhibitors, it has been shown that celestine blue B is oxidized in vitro by HOCl and its derivatives as a result of neutrophil myeloperoxidase activity. The oxidation of celestine blue B by HOCl-modified human serum albumin (HSA-Cl) and inhibition of this process by monoclonal antibody against HSA-Cl (IgM class) was also found. Conclusion. Based on the developed method using celestine blue B, it is possible to conduct a sensitive analysis for the presence of HOCl-modified proteins (chloramines, etc.), to investigate the effect of various agonists and drugs on myeloperoxidase activity and exocytosis from the neutrophil granules. Keywords: celestine blue B; HOCl; myeloperoxidase; neutrophils; fluorescence
URI: http://elib.bsu.by/handle/123456789/234655
Appears in Collections:Кафедра биофизики

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
2019 Целестиновый синий B зонд для регистрации HOCl.pdf827,95 kBAdobe PDFView/Open


PlumX

Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.